默格高压细胞破碎机破碎原理:
l 电机驱动
l 柱塞泵加压
l 均质点破碎,产生空穴效应、剪切效应、撞击效应
高压破碎的要点:
l 压力:均质机的压力越高,空隙效应越大,破碎率越高。默格的机器压力达1500bar。
l 阀结构:默格专业的破碎阀结构,细胞冲击的速度远远高于其它均质机,撞击后破碎效率非常高。
l 温度控制:高压破碎会大量产热,默格专利的在位冷却系统,将瞬间降低物料温度。
适用案例:酶工程兽用/人用疫苗HPV疫苗融合蛋白核酸胰岛素等
表达载体:动物细胞、大肠杆菌、芽孢杆菌、酵母菌、嗜热杆菌等
工艺流程:通过菌种转基因的方式表达蛋白或核酸等物质,经过破碎细胞壁,离心纯化的手段得到最终的产品,一般工艺流程为:DNA转接→菌种培养→获得湿菌体→缓冲液重悬→破碎细胞壁→离心→纯化
典型应用1:革兰氏阴性短杆菌
发酵后,离心得到菌体
按15%~20%的菌体浓度,加入磷酸盐缓冲溶液。
开冷水机,将整机的温度降低。
加入物料,加压到800~1000bar的压力,破碎后的物料从出料管收集。
如果破碎率不够,做第二次破壁
典型应用2:酵母菌
酵母菌和霉菌是真核生物,细胞壁成分是纤维素。
需要1200bar以上的压力。
一般需要使用破碎阀,并均质2~3遍。
温度控制非常重要
设备的稳定性和阀的寿命比较重要